原生生物与蠕虫观察¶

传统动物学实验常把眼虫、变形虫、草履虫和疟原虫放在同一次显微观察中，再以蛔虫连接“蠕虫”形态与多细胞动物解剖。这种编排用于训练从活细胞运动、临时装片到染色血膜、整体标本和组织切片的观察转换，分类关系则按现代系统处理。“原生生物”汇集了多个相距很远的真核支系，“蠕虫”只是对细长柔软体形的概括；眼虫属于眼虫类，变形虫属于变形虫类，草履虫和疟原虫虽同在囊泡虫大支系中，却分别属于纤毛虫与顶复门，蛔虫则是蜕皮动物中的线虫。经典材料名称适合沿用为教学标签，相似运动或体形与真正的亲缘关系则须分开。¹

观察按“活体单细胞—固定血膜—完整线虫—解剖标本—横切片”的证据顺序展开。显微镜照明、盖片、油浸和绘图的一般方法见显微观察与标本制备；蛔虫开口时遵循小切口与逐层暴露，先保留原位关系，再分离器官。

材料身份与观察层级¶

记录单上先写清材料名称或培养物编号、来源、是否活体、培养或保存介质、制片方法、染色、切面方向和观察日期。培养瓶标签写“眼虫”并不能保证瓶中只有一种生物；沉积物、藻团和细菌聚集处也可能出现其他鞭毛虫、纤毛虫、轮虫或碎屑。第一次扫片以“目标样对象”和“伴生对象”分别记录，未凭稳定形态确认时不把视野中的绿色细胞都写成眼虫，也不把所有变形运动的细胞都定为 Amoeba proteus。

活体临时装片提供运动、胞质流动、伸缩泡周期和摄食流等时间证据，固定整装片或染色片则便于反复定位细胞核、表面结构和寄生阶段。蛔虫完整标本显示前后、背腹与雌雄差异，剖解显示器官的连续走向，横切片显示体壁、体腔与管状器官的截面关系。不同材料回答不同问题：固定片上清楚的核不证明活体中的核会呈同样颜色，单张横切片也不能独自还原整条生殖管的前后连接。

观察从低倍开始。先寻找对象、判断密度和运动范围，再把目标移到视野中央换用高倍；透明活体可适度调整聚光器孔径或采用相差等合适方式形成对比，不以过强照明和持续追焦增加光热负担。每次换倍后重新确认对象仍是同一个体，并记录物镜、成像方式和比例尺。透明结构在不同焦层先后变清，绘图若合并多个焦层，应明确标为解释性合成。

活体临时装片与运动控制¶

眼虫培养物可从绿色细胞较集中的区域取一小滴，变形虫则常在培养液底部泥沙或碎屑表面附近寻找。液滴以能够维持水层而不让细胞高速漂移为宜，盖玻片从一侧缓慢放下，避免气泡与强烈水流。装片后先静置片刻：变形虫会在机械扰动后收圆，眼虫和草履虫也可能因水流表现出与自主运动不同的位移。若液体蒸发，从盖片边缘补加相容介质；不直接压盖片来“固定”目标。

草履虫移动过快时，可在滴液前放入少量疏松棉纤维，让细胞在纤维之间形成的通道中减速。棉纤维应是空间障碍而不是挤压工具；用吸水纸大量抽走液体会压扁细胞、改变伸缩泡节律并加速缺氧。课程也可使用经过验证、对目标细胞影响较小的增黏介质，但须设置未处理对照，区分正常运动和制片诱导的迟缓。

碘液、乙醇和强酸会迅速改变或终止活体状态，不能一边用它们固定、染色，一边把随后看到的形态解释成正常运动中的细胞。若需要核或储藏物对比，可另制固定染色片并与未处理活体并排观察。鞭毛、纤毛等细结构首先通过适当照明、焦层和运动轨迹辨认；是否加用染色由明确的制片目的决定。

眼虫的鞭毛游泳与眼虫式运动¶

低倍视野中先记录细胞是沿长轴游泳、旋转前进，还是贴近基质缓慢改变轮廓。眼虫的主要游泳动力来自前端储蓄泡区域伸出的鞭毛；细胞表层由螺旋排列的表膜条支撑，部分种能通过相邻表膜条相对滑动产生连续的收缩和伸展，这种大幅度形变称为眼虫式运动或 metaboly。鞭毛推进和胞体形变是两种可以同时出现、却应分别描述的运动。²

高倍下从细胞前端逐项定位。前端的凹入空间是储蓄泡或鞭毛囊，鞭毛由此伸出；它不是摄食性的“胞口”。许多教学眼虫有一条明显伸出的鞭毛，另一条较短或留在储蓄泡内，具体数目和伸出状态须按实际物种判断。储蓄泡附近常见红橙色眼点，其色素颗粒为光感受装置提供方向性遮光，真正的光感受结构与鞭毛基部相联系，不能把眼点简单称作一枚小眼睛。³

叶绿体的数目、形状、边缘和蛋白核配置是眼虫类传统分类性状，需在多个细胞、多个焦层中比较；中央或稍靠后的核在普通活体明场下未必始终清楚。胞质中还可见无色副淀粉粒等储藏颗粒，前端伸缩泡系统周期性收集并排出多余水分。把叶绿体、核、储藏颗粒和气泡区分开时，要看边界、位置、焦层变化以及是否随时间发生规律性收缩，而不能只依赖“透明圆形”或“颜色较深”。

变形虫的伪足与胞质流动¶

变形虫先在低倍下寻找缓慢改变轮廓、贴近基质爬行的透明细胞。目标个体进入较平稳的水层后，记录伪足从何处伸出、旧伪足怎样回缩，以及胞质颗粒是否流向新形成的前端。叶状伪足在基质上建立接触，胞质流动随之重新分配细胞体；一次形变只是连续运动中的瞬间，不宜用单张轮廓作为物种鉴定依据。²

高倍下常能区分靠近表面的透明外质区和含较多颗粒、液泡的内质区。二者是随运动不断重排的胞质状态和光学区域，不是永久固定的两层组织。新伪足前缘可出现透明帽状区，颗粒性内质随后流入；食物泡随胞质移动，伸缩泡则经历充盈和排空。核的边界受焦层、细胞厚度和照明影响，活体中未见核不等于没有核，也不宜把静止颗粒直接标作核。

盖片压力、液流、温度和渗透变化都会使变形虫缩圆或产生异常突起。装片稳定后仍未见运动时，先比较液滴边缘与中央、改变焦层并检查同批未受压材料。绘图至少保留一个完整轮廓和伪足方向，并用箭头另示胞质流向；外质、内质、食物泡、伸缩泡和核只标注实际辨认到的结构。

草履虫的纤毛、口器与液泡系统¶

草履虫在低倍下常沿长轴旋转前进，遇障碍后改变纤毛摆动并重新定向。以常见的尾草履虫为例，前端较钝圆，后端渐尖，腹侧有一条斜向细胞中部的口沟，使整个细胞并非严格左右对称。表面纵列纤毛共同完成游泳，口沟内的特化纤毛则形成摄食水流。观察时先确定前后和口沟所在面，再在同一细胞上比较直线游泳、转向和穿过棉纤维间隙时的形变。

表膜及其下方的皮层结构使细胞保持相对稳定而有一定柔性的轮廓；通过狭窄纤维间隙时出现的变形同时受到皮层、细胞内压和外界挤压影响，不能只归因于“弹性表膜”。口沟向内连续为口腔区、胞口和胞咽，食物泡在胞咽末端形成后进入内质循环，残渣最终在胞肛区域排出。观察到食物颗粒沿固定路线移动时，应记录时间序列，而不是把多个时刻的食物泡画成一组静止器官。

常见草履虫前、后部各有一个伸缩泡复合体，周围辐射状收集管在充盈期形成星状轮廓。收集管可见六或七条等数量，具体数目随物种与观察时相而变。大核承担多数营养生长阶段的基因表达，小核参与有性过程和新核系建立；尾草履虫的小核常紧邻大核，普通活体明场下可能难以分辨。核观察应使用课程提供的合格固定染色片，不直接在活体滴加冰醋酸。⁴

刺丝泡排列在皮层中，受到刺激时可把内容物射出。未处理活体上往往只见细小杆状或颗粒状影像，固定、染色或化学刺激又可能诱发大规模释放；因此“满覆刺丝泡”和“已经射出的丝”必须区分。纤毛、皮层囊泡、刺丝泡、食物泡与伸缩泡处在不同层次，改变焦层后分别核对。

疟原虫染色血膜¶

疟原虫观察只使用来源明确、已经固定染色的教学血膜或经授权的数字切片，不在普通动物学课堂采集或处理新鲜人血。先读玻片标签，确认厚血膜、薄血膜、染色方法、物种标注和质量状态；再以低倍检查染色均匀度和合适观察区，最后按低倍定位与油浸观察进入高倍。厚血膜中红细胞被溶解，单位面积寄生虫相对集中，适合检出；薄血膜保存红细胞轮廓和寄生虫与宿主细胞的关系，更适合形态分期和物种判断。⁵

先区分红细胞残影、白细胞核、血小板、染料沉淀和真正的寄生虫，再辨认环状体、发育中的滋养体、裂殖体和配子体。薄血膜中可同时比较寄生虫胞质、染色质点、疟色素、感染红细胞大小和点彩；厚血膜则要接受宿主细胞轮廓大多消失这一事实。热带疟原虫常见细小环状体、一个红细胞内多重感染或贴边型，成熟配子体可呈新月形；间日疟原虫感染的红细胞常增大，滋养体较阿米巴样并可出现薛氏点；三日疟原虫可见带状滋养体。诺氏疟原虫等还会与这些形态发生重叠。教学标本可以练习组合特征，临床结论则须由合格实验室按现行流程在足够视野中复核，必要时采用分子或其他检测。⁶⁷

绘图应保留宿主红细胞边界、寄生虫在细胞内的位置、染色质与胞质关系，并注明厚片或薄片、染色和油浸物镜。不能把不同物种或不同生活史阶段从多张玻片拼入一个“同一视野”，也不能根据教科书期望删去染料沉淀或形态不典型的细胞。

蛔虫的外形与雌雄鉴别¶

教学常用的人蛔虫 Ascaris lumbricoides 成虫体长可达数十厘米，身体圆柱形、无分节、两端渐细，表面有横纹和沿身体纵行的侧线。前端口周有一枚背唇和两枚腹外侧唇，是完整成虫的重要定位标志；前部腹面有排泄孔，但其与口端的绝对距离随个体大小和固定状态变化，不用“固定 2 mm”作为唯一判据。蛔虫与猪蛔虫的形态和遗传关系非常接近，来源不明标本仅凭肉眼不宜强行定种。⁸

雌虫通常较长而粗，后端较直，肛门位于近末端腹面；阴门位于身体前、中段交界附近的腹面，常表现为横裂。雄虫通常较短，后端向腹面弯曲，肠与生殖管共同开入泄殖腔，一对交合刺可由泄殖孔伸出。比较时把雌、雄并排同向摆放，依次记录长度、最大直径、后端弯曲、末端开口和生殖孔；“较大”只在同批成熟标本中作辅助特征，不能替代开口和尾端结构。

蛔虫开口与生殖管连续追踪¶

使用机构提供、已经固定并按课程流程处理的标本。确认前后和背腹后，让头端避开操作者面部，在后部背侧挑起体壁建立小切口；剪刀尖始终朝向体壁，沿纵向逐步向前延长。遇到阻力时停下辨认角质层、表皮、肌肉和下方器官，重新建立体壁与内脏之间的间隙，以免把组织粘连误作前部肌肉。体壁展开后随进度固定，针距以保持适度张力和不遮挡切线为准，不设越密越好的固定规则。

打开后先辨认中央较直的肠管和两侧盘曲的生殖管，记录它们的覆盖和交叉，再决定分离次序。若任务是展示生殖系统，可在记录原位关系后从适当端剪断肠管，沿其自然连接轻轻移开；不要先抓住最粗的管道向外拉，因为雌虫子宫、雄虫储精囊和肠管在固定后都可能呈浅色长管。器官身份须由管径渐变、内容物、与前后结构的连续性以及最终开口共同确认。

雌虫有两套细长生殖管。每套从细而盘曲的卵巢连续到较粗的输卵管和粗大的子宫，两条子宫再汇入阴道并通向阴门；沿一侧由细到粗追踪后，再在另一侧复核。卵巢内生殖细胞围绕中央轴排列，输卵管中可见逐渐成熟的卵母细胞，子宫腔内常含大量卵。不能把“看见卵”单独当作子宫定义，因为卵在管道中的成熟和制片位置存在连续过渡。

雄虫只有一套生殖管，由细长精巢接输精管、膨大的储精囊和射精管，最后通入泄殖腔。沿管径和内容物变化连续追踪，比从尾端向前猜测每一段更可靠。线虫精子没有鞭毛，成熟后以变形运动参与受精；固定切片中所谓“条形精子”可能混合了精细胞阶段、观察方向和固定形变，报告宜描述实际轮廓而不把一种切面当作恒定形态。

蛔虫横切面的层次¶

低倍先观察切片是否完整、近圆以及切面处于虫体哪一段，再由外向内辨认角质层、表皮、纵肌、原体腔、肠管和生殖管。角质层呈多层轮廓，下面的表皮多为合胞体，在背、腹和左右两侧向内增厚为四条纵行体线；背、腹线邻近主要神经索，左右侧线内可见排泄管。四条体线把纵肌分为四个肌区，线虫缺少与之配对的环肌层。纵肌细胞靠外的收缩部含肌丝，含核的胞体或原生质部向原体腔内突出，这一方向关系比“端部、基部”两个词更易在切片上复核。

原体腔（传统亦称假体腔）位于体壁与消化、生殖管之间，腔面没有完整的中胚层上皮。肠管通常由单层上皮围成，腔面与固定收缩程度随切面而变。背、腹线的大小和形状受切片方向、挤压和染色影响，腹线粗细不能作为独立鉴别标准。线虫体壁与原体腔提供了这一横切面框架。

雌虫横切片中，同一张切面常因生殖管盘曲而出现多个管腔。卵巢截面较细，生殖细胞常围绕中央轴放射排列；输卵管管径增大、管壁和腔内细胞状态改变；子宫最粗，腔明显并可含厚壳卵。雄虫精巢可见围绕中央轴的生殖细胞，输精管和储精囊逐渐增粗，后者腔内含较多精细胞。每个截面名称都要结合管径、壁、内容物和同片其他截面判断；仅凭“车轮形”不能区分卵巢与精巢，也不能从一张切片推断完整生殖管的前后顺序。

绘图、比较与结果复核¶

活体观察记录保留时间维度。眼虫画出长轴、鞭毛伸出端、眼点、叶绿体和实际看到的核或液泡，并另以连续轮廓表示一次眼虫式运动；变形虫记录伪足方向与胞质颗粒流向；草履虫记录前后、口沟、纤毛、食物泡和伸缩泡的一次充盈—排空周期。运动轨迹、结构图和解释性合成图分开，不把几个不同个体的最佳结构拼成“一个完整细胞”。

疟原虫图注明厚片或薄片、宿主细胞是否保留、寄生阶段和染色；蛔虫至少完成雌雄外形比较、一个个体的原位解剖图和横切面图。横切面标注四条体线、肌区、原体腔、肠和生殖管，并写明性别与推定管段。图中找不到的结构保留为空缺或“未确认”，把判定依据写在图旁，而不是照着标准图补画。

最终比较围绕运动装置、形态稳定性、营养与渗透调节结构、核与生殖方式、样品状态和证据尺度展开。鞭毛、伪足和纤毛都能产生位移，但结构基础和控制方式不同；眼虫、变形虫与草履虫的伸缩泡均参与淡水环境中的渗透调节，却不是物种鉴定的单一标签；疟原虫血液阶段和蛔虫成虫又必须放回宿主与生活史解释。现代系统学与分子检测补充亲缘和鉴定边界，经典显微观察、完整标本和切片仍负责提供可核查的形态证据。

标本安全与教学边界¶

活体眼虫、变形虫和草履虫使用来源明确的教学培养物，观察后按机构流程灭活或处置，不随意排入环境。疟原虫只使用合格固定血膜或数字资料；蛔虫只使用机构处理的固定成虫和封固切片，不把新鲜粪便、未经固定的人血、来源不明寄生虫或可感染虫卵带入普通课堂。保存液、染液、玻片锐边和油浸清洁分别按化学品说明、锐器流程与显微镜要求管理。

活体临时装片以尽量保持正常状态为目标，固定染色片以结构对比和可重复定位为目标。为了“看清”而滴加未经验证的碘液、乙醇、冰醋酸或其他刺激物会同时改变细胞生理与实验风险；课程若确需固定或染色，须使用经过风险评估的独立方案，并在记录中明确处理前后。普通动物学课堂不开展患者诊断、病原体培养或寄生材料制备。

参考资料与延伸阅读¶

• Adl SM, Bass D, Lane CE, et al. Revisions to the Classification, Nomenclature, and Diversity of Eukaryotes. Journal of Eukaryotic Microbiology. 2019;66:4–119.
• Clark MA, Douglas M, Choi J. Characteristics of Protists；Groups of Protists. Biology 2e. OpenStax; 2018.
• CDC DPDx. Ascariasis；Malaria；Blood Specimens—Microscopic Examination.
• World Health Organization. Microscopy for the detection, identification and quantification of malaria parasites on stained thick and thin blood films in research settings. 2015.